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外源基因导入哺乳动物细胞中,并使其得到可控

来源:www.fanlv.net  时间:2022-10-03 00:33   点击:125  编辑:金启   手机版

用质粒(存在于菌类细胞中的小型环状DNA上面有特殊基因)或是灭活的病毒(不是死的就是有点类似植物人的)作运载体(能友好借居在宿主细胞中对宿主细胞正常生理活动无影响)显微注射到细胞中,外源基因就可能表达。

高中生物 基因的本质与表达 基因:兔血红蛋白基因。表达的细胞:兔成熟红细胞。表达产物:兔血红蛋白。

这你需要了解血红细胞的形成:血红细胞是造血干细胞分化的一种,在初期血红细胞(后用它)是有细胞核,核糖体的。但是在成长过程中它将自己的细胞核排出去。没有细胞核就不会继续制造核糖体,但是随着时间推移,核糖体也会被分解,渐渐的核糖体也就都消失了。
同时你要明白表达不正确的话,细胞要不自行死亡,要不被分解掉,要不就是超人的诞生了.....

在表达后修饰上,大肠杆菌,酵母,昆虫病毒和人的细胞有什么差异?

大肠杆菌是细菌,酵母也是细菌,昆虫病毒是病毒,人的细胞是细胞,表达后修饰,就是NDA/RNA或者蛋白质转录方面的表达吗?我想主要是复制的速度不同。

cmv启动子 在哺乳动物细胞里存在吗

区别主要在表达重组元件还有基因标记。promoter,terminater是宿主识别的的,真核可能还需要enhancer,重组到基因组中的话,需要介导重组的序列。筛选标记绝大多数不一样。
真核表达载体在宿主中以质粒形式存在的,可以复制。哺乳动物细胞里没有质粒,外源基因整合到基因组中的,所以不能扩增。由于整合多个位点而产生多拷贝。

如果说载体的重组,没区别,都是一样的酶切加连接。细菌转化也一样。真核载体在细菌中也可以进行增值。
表达的话,一般原核是直接转化细菌通过ISPG诱导进行表达,蛋白表达后的形式一般是通过包涵体或者是分泌型蛋白存在,这种蛋白如果是真核基因来源,不一定拥有相应的蛋白生物活性,因为原核表达缺少真核转录后的蛋白修饰机制。但是原核表达的蛋白容易纯化,很容易获得纯化蛋白做为免疫原等进行使用。
而真核表达则是通过脂质体或者是PEI的等转染试剂在体外通过和质粒形成复合体, 将质粒导入细胞后进行瞬时表达。称为瞬时表达的原因是因为质粒在真核细胞中不能扩增。并且不断被细胞所降解,这种表达在一定的时间后就会消失。除非质粒被整合进入细胞的基因组,通过质粒上带的筛选标记,如G418等,通过筛选得到一株稳定表达你的目的蛋白的细胞克隆。但是这种细胞克隆的表达量相比瞬时表达会非常低甚至于检测不到。真核表达的特点是所表达的蛋白一旦表达即拥有相应的生物学活性,因此真核瞬时转染往往用于研究单个基因在细胞中的功能。而不能用于纯化蛋白。
此外,真核表达还有用于昆虫细胞的杆状病毒表面展示系统,其本质也是通过转染含有目的基因的重组质粒(特殊质粒,专用于杆状病毒表面展示系统)给昆虫细胞,然后使用野生型的杆状病毒或者是人工改造过的杆状病毒来感染相应的细胞,来是病毒和质粒在昆虫细胞体内发生重组,获得目的基因,并且最终表达于病毒子的表面,所以成为表面展示系统。

为什么动物体细胞表现全能性比植物体细胞表现全能性小?

事实上,动物细胞的全能性并不比植物的小,尽管目前没有用动物体细胞培养出整体的动物体,但这不足以比较动物和植物的细胞全能性的大小。像动物的干细胞全能性很好,而一些高度分化的植物细胞,一样是全能性很弱,没办法做组织培养。所以,全能性的大小一般是由分化程度的高低判断的,动物和植物的差异比较还是很难研究的,毕竟他们的差异很大,不能判断彼此的分化程度。
在分化角度讲,脱分化的过程很复杂,成功率很小,所以分化程度的高很难表现全能性。至于实验表现动物细胞的全能性,因为动物细胞的培养等因素远比植物细胞复杂,所以目前实验上还没办法用动物分化细胞培育出动物整体。

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